抗體是廣泛研究和體外診斷 (IVD) 應(yīng)用的核心試劑。根據(jù)生產(chǎn)方法，它們可以分為多克隆或單克隆，或者根據(jù)它們識別的靶標類型分為主要或次要試劑。選擇抗體時要考慮的因素包括其驗證的嚴格程度以及它們是否有足夠的數(shù)量來滿足特定項目的長期需求。

什么是多克隆抗體和單克隆抗體？

已建立的抗體生產(chǎn)方法是通過用感興趣的蛋白質(zhì)對動物進行免疫來啟動的。然后由抗原呈遞細胞處理，以便能夠通過循環(huán) B 淋巴細胞進行檢測，每個 B 淋巴細胞在其表面表達不一樣的抗體。目標識別后，B 淋巴細胞進行克隆擴增并分泌可從血清中純化的抗體。以這種方式產(chǎn)生的抗體被描述為多克隆的，因為所得產(chǎn)物包含來自多個B淋巴細胞的抗體，每個B淋巴細胞識別不同的表位。

作為該方法的替代方法，可以分離 B 淋巴細胞并用于產(chǎn)生雜交瘤。通過在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中稀釋它們，使得多孔板的每個孔僅接收一個雜交瘤，可以測試細胞上清液并鑒定表現(xiàn)很好的克隆。通過這種方法產(chǎn)生的抗體被描述為單克隆抗體，因為最終產(chǎn)品中的每種抗體都是相同的。多克隆抗體的優(yōu)點是，由于表位冗余，它們可以提供信號放大，而單克隆抗體則受益于高特異性、一致的性能和有保證的長期供應(yīng)。

什么是一抗和二抗？

一抗直接與特定抗原（例如細胞骨架蛋白或細胞因子）結(jié)合，而二抗則用于間接檢測。這意味著只有當(dāng)一抗識別出它們的靶標時，它們才會與一抗結(jié)合。二抗是通過使用其他物種的抗體對動物進行免疫接種來產(chǎn)生的，并且通常用于通過多個二抗與每個一抗的結(jié)合來提供信號放大。

抗體選擇的注意事項

選擇抗體時需要考慮的因素包括是使用多克隆還是單克隆、是否需要直接或間接檢測以及將采用什么類型的讀數(shù)。雖然辣根過氧化物酶 (HRP) 等酶通常用于比色或化學(xué)發(fā)光檢測，但熒光團更適合流式細胞術(shù)或免疫組織化學(xué) (IHC) 等多重應(yīng)用。至關(guān)重要的是，應(yīng)該證明抗體試劑能夠特異性識別其目標抗原，而不會表現(xiàn)出不需要的交叉反應(yīng)。

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